Sadržaj

• Glavna razlika
• Južni bloting vs Western Blotting
• Usporedni grafikon
• Što je južni bloting?
• Što je Western Blotting?
• Ključne razlike
• Zaključak

Glavna razlika

Glavna razlika između Southern Blottinga i Western Blottinga je u tome što je Southern Blotting tehnika koja se koristi za otkrivanje određenog fragmenta DNA u određenom uzorku, dok se Western Blotting koristi za otkrivanje određenog proteina u određenom uzorku.

Južni bloting vs Western Blotting

Pljeskavica je tehnika kojom se znanstvenici koriste za odvajanje različitih vrsta molekula iz smjese ili uzorka. U ovoj se tehnici makromolekule poput nukleinskih kiselina (DNK i RNA) i proteina u smjesi kreću kroz gel ploču. Ovdje će se sitne čestice kretati brže od krupnijih. Te se molekule pritisnu na površinu imobilizirane membrane koja prenosi molekule na membranu. Postoje različite vrste blotiranja na temelju otkrivanja određenog materijala, tj. Blotiranja u južnom dijelu, sjevernog blotiranja i zapadnog blotiranja. Southern blotting je ona vrsta blotiranja koja se koristi za otkrivanje DNK, dok se blotting koristi za otkrivanje proteina. Southern blotting razvio je Edward M. Southern 1975. Dakle, poznato je kao Southern blotting. S druge strane, raspršenje zapadnjača razvila je grupa George Starka na Sveučilištu Stanford 1979. To se ime koristilo za podudarnost s južnom pjenom. Južno blotiranje se koristi za pronalaženje specifične sekvence DNA dok se zapadnom blotom koristi kako bi se utvrdila specifična sekvencija aminokiselina ili proteina.

Usporedni grafikon

Južni bloting	Western Blotting
Tehnika koja se koristi za pronalaženje specifičnog niza DNK-a u određenoj smjesi poznata je i kao južnjačka mrlja.	Tehnika koja se koristi za pronalaženje određenog niza aminokiselina proteina u određenoj smjesi poznata je kao južnjački blot.
Razvijen od
Južno mrlje razvio je Edward M. Southern 1975. godine.	Western blot razvio je grupa George Stark na Sveučilištu Stanford 1979. godine.
Vrsta detekcije
Southern blot se koristi za pronalaženje specifične sekvence DNA.	Western blot se koristi za pronalaženje specifične sekvence aminokiselina ili proteina.
Načelo
Djeluje na principu hibridizacije.	Djeluje na principu imunodetekcije ili interakcije antigen-antitijelo.
Sonda
Kao sonda koristi se jednolančana DNK ili ponekad RNA.	Primarna i sekundarna antitijela koriste se kao sonda.
Gelna elektroforeza
Elektroforeza gela agaroze koristi se u južnom upijanju.	SDS PAGE / Poliakrilamidni gel koji se koristi za odvajanje proteina u zapadnom pjevanju
Postupak brisanja
Južno začepanje slijedi postupak prenosa kapilara.	Western Blotting slijedi postupak električnog prijenosa.
Uzorak
Za vrijeme južnog mrljanja, uzorak je potrebno denaturirati.	Za vrijeme zapadnog upijanja, uzorak treba biti u svom izvornom stanju.
Blokiranje
Nijedan korak poput blokiranja nije uključen u južno uklanjanje blotiranja.	Za vrijeme zapadnog začepljenja, nespecifična mjesta antitijela blokirana su na papiru nitroceluloze uz pomoć mlijeka u prahu ili goveđeg serumskog albumina (BSA).
Načini označavanja
Uobičajene metode označavanja koje se koriste u južnom blotingu su upotreba kromogenih boja ili radioaktivno označavanje ili fluorescentno označavanje itd.	Metode obilježavanja koje se koriste u zapadnom blotingu su upotreba fluorescentno obilježenih antitijela ili radioaktivno označavanje, kromogena bojila ili stvaranje diaminobenzidina itd.
Metode otkrivanja
Otkrivanje svjetlosti, autoradiograf i promjene boje koriste se kao metode detekcije u južnom mrlju.	Metode detekcije kod zapadnog mrljanja su promjene u boji i detekcija svjetlosti itd.
primjena
Južna blotina koristi se za otkrivanje DNK, testiranje očinstva, ukazivanje DNA, identifikaciju žrtava, identifikaciju kriminalaca, pronalaženje zaraznih uzročnika i identifikaciju mutacije ili preuređenja gena, itd.	Western blotting koristi se za pronalaženje broja proteina u mješavini, za otkrivanje prisutnosti HIV-a, virusa i bakterija itd. U serumu, za otkrivanje neispravnih proteina i koristi se kao određena mjera za herpes, hepatitis B, Lyme bolest i Creutzfeldt-Jacobova bolest, itd.

Što je južni bloting?

Južno upijanje je najstarija metoda nakupljanja koju je dao Edwin Southern, nazivajući se južnim upijanjem. Koristi se za pronalaženje određenog slijeda DNK u određenom uzorku ili smjesi. Koraci koji uključuju tijekom južnog blotmana su elektroforeza, prijenos i otkrivanje specifičnih sekvenci. Prije svega, DNA se fragmentizira uz pomoć specifičnog restrikcijskog enzima. Potom se željeni fragmenti DNK razdvoje gel elektroforezom. Ti se fragmenti denaturiraju uz pomoć alkalne otopine, npr., NaOH, itd. Da bi se razdvojila dva lanca DNA. Ti se jednolančani fragmenti DNK tada prenose na membranu postupkom blotiranja. Ova DNA vezana membranom se zatim obrađuje označenom sondom. Ova će se sonda pričvrstiti na njezin komplementarni lanac na membrani DNA koji se može vizualizirati autoradiogramom itd.

Što je Western Blotting?

Metodu zapadnog razmazivanja izumila je grupa George Starka na Sveučilištu Stanford koja se koristi za identificiranje specifičnog slijeda aminokiselina u proteinu. Poznat je i pod nazivom proteina ili blokada imuniteta. Koraci tijekom blokade zapadnjaka su elektroforeza, prijenos i otkrivanje specifičnih proteina. Prije svega, homogenizirajte smjesu. Zatim razdvojite molekulu koja vas zanima uz pomoć elektroforeze. Prenesite te molekule na membranu i identificirajte specifični protein pomoću specifične sonde.

Ključne razlike

1. Tehnika koja se koristi za pronalaženje specifičnog niza DNK-a u datoj smjesi poznata je kao južnjački blot, dok je tehnika koja se koristi za pronalaženje specifičnog slijeda aminokiselina proteina u određenoj smjesi poznata i kao južnjački blot.
2. Južno upijanje razvio je Edward M. Southern 1975. tako, poznato kao južno upijanje. S druge strane, zapadnu mrlju razvila je grupa George Stark na Sveučilištu Stanford 1979. godine.
3. Southern blot se koristi za pronalaženje specifične sekvence DNA. Suprotno tome, Western blot se koristi za pronalaženje specifične sekvencije aminokiselina ili proteina.
4. Southern blotning djeluje na principu hibridizacije s druge strane; Western blot djeluje na principu imunodetekcije ili interakcije antigen-antitijelo.
5. Jednolančana DNK ili ponekad RNA koristi se kao sonda kod Southern blottinga s druge strane, u Western blot primarna i sekundarna antitijela se koriste kao sonda.
6. Elektroforeza gela od agaroze koristi se u južnom upijanju, dok se SDS PAGE / poliakrilamidni gel koristi za odvajanje proteina u zapadnom upijanju.
7. S druge strane, južno začepljenje slijedi postupak kapilarnog prijenosa; Western Blotting slijedi postupak električnog prijenosa.
8. Za vrijeme blokade južnjačkog uzorka, uzorak treba denaturirati, dok za vrijeme zapadnog blotiranja uzorak treba biti u svom izvornom stanju.
9. Niti jedan korak poput blokiranja nije uključen u južno mrlje s okretanja, za vrijeme zapadnog blotkcije nespecifična mjesta protutijela su blokirana na papiru nitroceluloze uz pomoć mlijeka u prahu ili goveđeg serumskog albumina (BSA).
10. Uobičajene metode označavanja koje se koriste kod južnog mrljanja su upotreba kromogenih boja ili radioaktivno označavanje ili fluorescentno označavanje itd., Dok su metode označavanja kod zapadnog mrljanja upotreba fluorescentno obilježenih antitijela ili radioaktivno označavanje, kromogene boje ili stvaranje diaminobenzidina itd.
11. Detekcija svjetlosti, autoradiograf i promjene boje koriste se kao metode detekcije u južnom mrlju, dok su metode detekcije u zapadnom mrlju promjena boje i detekcija svjetlosti itd.
12. Južna blotina koristi se za otkrivanje DNK, testiranje očinstva, DNK prstenje, za identifikaciju žrtava, za identifikaciju kriminalaca, pronalaženje uzročnika i identifikaciju mutacije ili preuređenja gena, itd. Suprotno tome, zapadni blot se koristi za pronalaženje broja proteina u mješavina, za otkrivanje prisutnosti virusa HIV, virusa i bakterija itd. u serumu, pronalaženje oštećenih proteina i koristi se kao određena mjera za herpes, hepatitis B, lajmsku bolest i Creutzfeldt-Jacobove bolesti, itd.

Zaključak

Gornja rasprava rezimira da je južnjavanje blota najstarija tehnika blotiranja koja se koristi za pronalaženje određenog segmenta DNA u uzorku, dok je zapadno blotiranje otkriveno potonje i korišteno je za identificiranje specifičnog slijeda aminokiselina ili određenog proteina.